人与畜禽交互MOUSE,无码亚洲一本aa午夜在线观看,国产又黄又爽又色的免费,思敏全集1一5正版免费看

產(chǎn)品目錄   Product catalog
聯(lián)系我們   Contact
搜索   Search
技術(shù)文章   Article首頁>>技術(shù)文章>>NK細(xì)胞活性檢測方法

NK細(xì)胞活性檢測方法

點擊次數(shù):2009 更新時間:2016-01-04

    NK細(xì)胞是一種異質(zhì)性、多功能的細(xì)胞群,具有抗腫瘤、抗感染和免疫調(diào)節(jié)功能,并參與移植排斥反應(yīng)和某些自身免疫性疾病的發(fā)生,因而通過制備NK細(xì)胞克隆對其功能進(jìn)行研究已受到人們的高度重視。測定人NK細(xì)胞活性多以K562細(xì)胞株作為靶細(xì)胞,而測小鼠NK細(xì)胞活性則用YAC細(xì)胞株,檢測方法多種多樣。

(一)形態(tài)法

    將效應(yīng)細(xì)胞與靶細(xì)胞按一定比例混合溫育,繼而用臺盼藍(lán)或伊紅Y等活細(xì)胞拒染的染料處理,然后分別計數(shù)著染的死細(xì)胞和不著染的活細(xì)胞,推算NK細(xì)胞活性。

1.材料

(1)靶細(xì)胞:K562細(xì)胞株或YAC細(xì)胞株。

(2)效應(yīng)細(xì)胞:NK細(xì)胞。

(3)含15%NCS的RPMI 1640培養(yǎng)液,5%臺盼藍(lán)染色液。

2.方法:

(1)效應(yīng)細(xì)胞的制備:將克隆的NK細(xì)胞用含15%NCS的RPMI 1640培養(yǎng)液懸浮,計數(shù)后調(diào)整細(xì)胞濃度至l×107/ml,備用。

(2)靶細(xì)胞的制備:取經(jīng)24h培養(yǎng)的靶細(xì)胞,用RPMI 1640培養(yǎng)液洗滌1次,1000r/min離心6min。棄上清液,用:RPMI 1640培養(yǎng)液重懸后計數(shù),并用0.5%臺盼藍(lán)染色計數(shù),活細(xì)胞數(shù)達(dá)95%以上時可用作靶細(xì)胞。以RPMI l640培養(yǎng)液調(diào)整至1×105/ml,備用。

(3)效應(yīng)細(xì)胞靶細(xì)胞作用:用40孔培養(yǎng)板,對照組1~3孔,每孔加100μl靶細(xì)胞,再加入RPMI 1640培養(yǎng)液100μl;實驗組4~6孔,每孔加100gl靶細(xì)胞,再加入效應(yīng)細(xì)胞100μl,效應(yīng)細(xì)胞與靶細(xì)胞的比例為50:1?;靹?,置5%CO2 37℃孵箱中培養(yǎng)過夜。

3.結(jié)果分析取m培養(yǎng)板,將細(xì)胞輕輕混勻成懸液,從每孔中取出30μl細(xì)胞懸液,加等量O.5%臺盼藍(lán)染液混合。室溫下5min后,計數(shù)白細(xì)胞數(shù)。對照組和實驗組每孔各計數(shù)100個細(xì)胞,分別記錄死亡細(xì)胞和活細(xì)胞數(shù),求出各組NK細(xì)胞活性的均值。

(二)酶釋放法

    將效應(yīng)細(xì)胞與靶細(xì)胞按一定比例混合溫育,離心沉淀,取上清液檢測靶細(xì)胞遭破壞后釋放出的酶含量。

(三)熒光法

    用熒光素標(biāo)汜靶細(xì)胞,經(jīng)與效應(yīng)細(xì)胞共溫后,離心去上清液,用熒光計檢測剩余的活靶細(xì)胞的熒光。

(四)核素法

    將效應(yīng)細(xì)胞與靶細(xì)胞按一定比例混合共溫后,離心檢測上清液或剩余靶細(xì)胞放射性的量,間接反映其活性。有靶細(xì)胞胞漿釋放法和胞核釋放法兩種。

(五)化學(xué)發(fā)光法

    當(dāng)效應(yīng)細(xì)胞與靶細(xì)胞接觸時,效應(yīng)細(xì)胞呼吸暴發(fā),生成極不穩(wěn)定的O 2-及OH一,放出光子,在發(fā)光劑存在條件下,可被光電倍增管接受和計數(shù),發(fā)光量與NK細(xì)胞殺傷能力相關(guān)。

上一篇 細(xì)胞克隆形成試驗 下一篇 繪制生長曲線的細(xì)胞培養(yǎng)實驗

021-69985169
13611928337

環(huán)保在線

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
波多野结衣在线播放| 性欧美xxxxx极品少妇| 上司人妻互换hd无码中文字幕 | 掀起裙子扶着巨物坐下去| 法国少妇xxxx做受| 无码熟妇人妻AV在线影片免费 | 性饥渴艳妇k8经典a片| 中文字幕av一区| 香蕉久久久久久久av网站| 脱胱了曰批30分钟免费app| 亚洲午夜精品久久久久久浪潮| jizzjizz日本护士水好多| 少妇多水xxxx色情免费| 被全村灌满精的雯雯| 亚洲 成人 综合 另类 图区| 午夜福利麻豆国产精品| 欧洲美熟女乱又伦av影片 | 国产激情精品一区二区三区| 总裁晚上含奶h嗯额嗯电影| 国产精品久久777777| 少妇被又大又粗又爽毛片欧美| 边吃奶边被躁欧美三级| 午夜性刺激免费看视频| 丰满女人又爽又紧又丰满| 年轻教师6电影完整版| 又长又粗又爽又黄少妇毛片| 春药玩弄少妇高潮吼叫| 啊轻点灬大巴太粗太长了视频免费 | 东北老女人大叫太痒过瘾| 真实单亲乱l仑对白视频| 国产综合久久久久久精品| chinese性老妇老女人| 偿还HD韩国中文版| 亚洲熟女综合一区二区三区| 中文字幕亚洲无线码在线一区| 成人欧美日韩一区二区三区| 亚洲gv钙片在线观看网站| 久久国产情侣露脸精品| 色综合天天综合网国产成人网| 亚洲AV午夜成人片精品电影| 五月香丁激情欧美啪啪|