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胱抑素CElisa試劑盒測(cè)定的常用模式--固相捕獲法測(cè)IgM抗體

點(diǎn)擊次數(shù):2446 更新時(shí)間:2018-02-08

胱抑素CElisa試劑盒在病原體急性感染的診斷中,通常需檢測(cè)IgM抗體,如急性甲型肝炎診斷的血清抗HAVIgM檢測(cè)、急性乙型肝炎病毒感染的血清抗HBc lgM檢測(cè)和TORCH項(xiàng)目的系列IgM檢測(cè)等。IgM抗體也有使用間接法測(cè)定的,如目前在市場(chǎng)上可見到的有些TORCH系列的IgM檢測(cè)試劑盒。在使用間接法測(cè)IgM抗體時(shí),由于臨床血清樣本中含有高濃度的IgG抗體,其中部分特異IgG抗體將與IgM抗體競(jìng)爭(zhēng)與固相抗原結(jié)合,從而干擾IgM抗體的檢測(cè)。
 
    因此,在使用間接法測(cè)定IgM抗體時(shí),通常須將血清樣本用抗人IgG抗體或SPA預(yù)處理,以去除IgG的干擾。這樣不但測(cè)定較為繁瑣,而且影響測(cè)定的特異性和靈敏度。目前,常用的IgM抗體檢測(cè)方法為捕獲法,即以抗人IgM抗體(抗人u鏈)作為固相抗體,當(dāng)加入血清標(biāo)本時(shí),其中的IgM類抗體(特異的和非特異的)即可被固相抗體捕獲,再加入特異抗原,其與固相上捕獲的IgM抗體結(jié)合后,加入酶標(biāo)抗特異抗原的抗體,zui后加入底物顯色。具體操作步驟如下:
 
    1.首先將抗人IgMbt鏈抗體于碳酸鹽緩沖液中40c下過夜包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗體,洗滌去除未與固相結(jié)合或結(jié)合不緊的抗體后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉,洗滌去除未結(jié)合的部分及雜質(zhì)。
    2.加入含待測(cè)IgM抗體的臨床樣本如血清等,溫育一定時(shí)間后洗板;此時(shí),待測(cè)樣本中的IgM抗體就會(huì)與固相上的抗P鏈抗體反應(yīng)而吸附于固相上。
    3.加入特異的抗原如HAV抗原、HBcAg等,溫育一定時(shí)間后洗板;此時(shí),特異抗原就會(huì)與固相上的特異IgM抗體發(fā)生反應(yīng)。
    4.加入酶標(biāo)記的抗特異抗原的抗體,溫育一定時(shí)間后洗板;此時(shí),在固相上即形成相應(yīng)的抗原抗體復(fù)合物。
    5.胱抑素CElisa試劑盒加入酶底物,溫育顯色測(cè)定。
酵母粉葡萄糖瓊脂    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    Yeast Extract Dextrose Chloramphenicol  Agar    用于食品中霉菌及酵母菌總數(shù)測(cè)定    250
Candida Elective 瓊脂    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    Candida Elective Agar to Nickerson    用于食品中Candida及酵母菌總數(shù)測(cè)定(Merck方法)    250
DTM培養(yǎng)基    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    DTM Medium    用于食品中真菌的培養(yǎng)(Merck方法)    250
DRBC瓊脂    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    DRBC Agar    用于食品中霉菌及酵母菌分離培養(yǎng)    250
WORT 瓊脂    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    Wort Agar    用于真菌,特別是酵母菌的計(jì)數(shù)和增菌培養(yǎng)(Merck方法)    250
WORT 肉湯    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    Wort Broth    用于真菌,特別是酵母菌的培養(yǎng)(Merck方法)    250
YGC瓊脂    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    YGC Agar    用于奶和奶制品中霉菌及酵母菌分離培養(yǎng)(ISO方法)    250
改良綠色酵母菌和真菌肉湯    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    m-GREEN YEAST and FUNGI BROTH    用于飲料中真菌及酵母菌檢測(cè)(Acumedia方法)    250
Littman 瓊脂    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    Littman Agar    用于真菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)    250
DG-18瓊脂    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    DICHLORANGLYCEROL (DG-18) AGAR     用于食品中霉菌和酵母菌分離培養(yǎng)(Acumedia方法)    250
胱抑素CElisa試劑盒

 

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